1. 歡迎來到期刊VIP網,使用學術咨詢服務
      期刊VIP網10年服務積淀,累計發表20萬份稿件,想要發表論文就來期刊VIP網
      快捷導航
      農業科技
      生物科學
      園林學
      生態學

      白英甾體化合物的抗炎活性研究

      發布時間:2020-12-25 09:06所屬分類:農業科技加入收藏

      摘 要:白英含有多種化學成分,具有潛在的藥用價值和開發前景,但抗炎機制的研究并不完整。本實驗以小鼠RAW264.7細胞為材料,研究白英甾體化合物的抗

        摘 要:白英含有多種化學成分,具有潛在的藥用價值和開發前景,但抗炎機制的研究并不完整。本實驗以小鼠RAW264.7細胞為材料,研究白英甾體化合物的抗炎作用機制,研究發現:白英甾體化合物能明顯抑制產生炎癥的小鼠RAW264.7細胞的TNF-α的炎癥因子的表達,提高炎癥細胞的線粒體膜電位,白英甾體化合物可能是通過保護線粒體來實現其抗炎作用。

        關鍵詞:白英甾體化合物;TNF-α;線粒體膜電位;抗炎

      現代農業研究

        炎癥是機體自發產生的一種正常反應,但如果反應過度,又會給機體帶來損傷。如何有效控制炎癥的過度損傷,減輕炎癥對身體帶來的危害,是如今所要研究的重要課題,對人類健康具有重要意義[1]。白英,又叫鬼目草、葫蘆草等,是茄科茄屬植物,屬多年生蔓性草本植物,分布十分廣泛[2]。白英有很大的藥用價值,其全草以及根部都可供藥用。目前臨床上對于白英的應用越來越多,在消腫解毒、抗腫瘤等方面尤為顯著。近年來,各研究學者開始對白英的抗炎作用進行研究,發現白英具有較好抗炎效果。研究表明,白英主要通過其各種化學成分發揮作用[3]。TNF-α是非常重要的一種炎癥因子,能夠反映細胞的炎癥水平,抑制TNF-α的表達,可以達到抗炎的目的。線粒體是真核生物非常重要的細胞器,在機體中發揮重要的作用,當機體產生炎癥時,線粒體會發生很明顯的變化,包括上調ROS水平、降低線粒體膜電位等,可以通過這些指標來觀察線粒體的情況,因此,研究白英甾體化合物的抗炎作用與對線粒體的關系具有重要意義。

        1 材料

        1.1 儀器

        細胞培養箱;超凈工作臺;酶標儀;倒置顯微鏡;電子天平;低速離心機;熒光顯微鏡等。

        1.2 試劑

        DMEM培養基;胎牛血清;PBS;雙抗;CCK-8試劑;TNF-α的ELISA檢測試劑盒;線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)。

        1.3 藥品與細胞

        白英甾體化合物干粉由吉林省中醫中藥研究院饋贈,利用PBS使其溶解,實驗所需細胞為小鼠RAW264.7細胞購自中國細胞庫,對照組為地塞米松。

        2 方法

        2.1 藥品配制及細胞培養

        取白英甾體化合物的干粉,用PBS將其溶解,然后過濾并進行高壓滅菌。小鼠RAW264.7細胞用DMEM培養基進行培養,加入胎牛血清和雙抗(青霉素、鏈霉素),在37℃、5%CO2的細胞培養箱中進行傳代培養,培養至對數生長期可供實驗使用。

        2.2 白英甾體化合物對小鼠RAW264.7細胞活力的影響

        取培養的小鼠RAW264.7細胞,加入培養基并輕輕吹打,使細胞懸浮到液體中,加入到96孔板中,使每孔體積200μL,細胞密度為1×104mL/個,放入培養箱中培養24h,使細胞貼壁生長,然后把孔內液體吸出,加入含有不同濃度的白英甾體化合物的DMEM培養基,并加入LPS,分為5組:空白組,白英甾體化合物高、中、低劑量組(白英甾體化合物的濃度分別為40μg·mL-1、20μg·mL-1、5μg·mL-1),地塞米松陽性對照組[4]。

        2.3 CCK-8法測定細胞活力

        上述5組作用24h后,每孔加入10μLCCK-8,靜置30min,把酶標儀的波長調至450nm,測定上述各孔吸收的OD值。

        2.4 白英甾體化合物對小鼠RAW264.7細胞TNF-α表達的影響

        細胞培養同上所述,分組情況同上,按照TNF-α的ELISA檢測試劑盒的說明書進行操作,測量小鼠RAW264.7的炎癥因子的表達情況。

        2.5 白英甾體化合物對小鼠RAW264.7細胞線粒體膜電位的影響

        在上述培養的細胞中,加入脂多糖,按照分組濃度,加入白英甾體化合物,在細胞培養箱中培養24h后,每組取1×105個細胞,重懸于0.5mL細胞培養液中,按照線粒體膜電位檢測試劑盒的說明書進行操作,以測定線粒體膜電位的變化情況[5]。

        2.6 數據的統計分析

        使用Graphpad Prism 5.0軟件對試驗數據進行統計學分析。

        3 結果

        3.1 白英甾體化合物對小鼠RAW264.7細胞活力的影響

        結果顯示,與空白組相比較,白英甾體化合物的高中低劑量組和陽性對照組細胞活性明顯偏低,白英甾體化合物的高中低劑量組又高于地塞米松組,但各組之間無統計學差異(P>0.05)。說明在試驗濃度范圍內,不同濃度的甾體化合物和地塞米松不影響小鼠RAW264.7細胞活性,對小鼠RAW264.7細胞沒有毒性作用,與林世和等研究結果一致[6]。

        3.2 白英甾體化合物對小鼠RAW264.7細胞TNF-α表達的影響

        結果顯示,與空白組比較,LPS顯著提升了小鼠RAW264.7細胞TNF-α的表達,其差異具有統計學意義(P<0.05),說明LPS誘導細胞產生炎癥,模型構建成功。與LPS組比較,40μg·mL-1和20μg·mL-1的甾體化合物與地塞米松能夠抑制小鼠RAW264.7細胞TNF-α的表達,其差異具有統計學意義(P<0.05),說明白英甾體化合物具有較好的抗炎作用。5μg·mL-1的甾體化合物則沒有顯示出抑制小鼠RAW264.7細胞TNF-α的表達的作用,對比LPS組,其差異無統計學意義(P>0.05),說明白英甾體化合物濃度較低時,其作用效果不明顯,與劉淑華等研究結果一致[4]。

        3.3 白英甾體化合物對小鼠RAW264.7細胞線粒體膜電位的影響

        通過JC-1法測定線粒體膜電位,用紅、綠2種顏色的熒光分別表示線粒體膜電位的高、低。結果顯示,空白組呈現紅色熒光,LPS組為綠色熒光,說明在LPS的刺激下,細胞產生炎癥;當加入白英甾體化合物后,線粒體膜電位有所提高,并且以劑量依賴性的方式增強線粒體膜電位,說明炎癥反應得到抑制。

        推薦閱讀:生態農業論文發表如何選擇期刊


      轉載請注明來自:http://www.aapkanpur.com/nongyekeji/54828.html

      上一篇:基于糧食安全的糧食生產供給側改革研究
      下一篇:農業土壤碳匯研究綜述

      幫您下載文獻

      *范文題目:

      *作者姓名:

      *期刊名稱:

        期刊刊期:

      *聯系方式:

      聲明:*號必填。下載文獻后將以文件形式發送至您預留的聯系方式,請確保有效性。寫好后點擊通知編輯

      乐彩网 www.soulshakti.org:凤凰县| www.alhondigadigital.com:余庆县| www.xinda-zq.com:和静县| www.sky161.com:兴隆县| www.daxingxiyiji.com:保亭| www.ostseeportal.org:高要市| www.fifth-wheels.com:盐亭县| www.ffgrx.cn:萝北县| www.southerncrossnat.com:黑河市| www.welcolan.com:晴隆县| www.pj558888.com:孝义市| www.golobd.com:雷州市| www.wwwxfplay.com:手机| www.cbplanningpartners.com:湖南省| www.488cl.com:峨山| www.borealmatters.org:汪清县| www.yujiangquan.com:江门市| www.damnkidbrand.org:仁怀市| www.gzjdvc.com:黄陵县| www.avalonwarriors.com:乌拉特中旗| www.boshichiji.com:英德市| www.dupse.com:武穴市| www.tredadlar.com:罗江县| www.play-nike.com:清水县| www.triple-star.net:安新县| www.hg18456.com:清涧县| www.nazliyarim.com:清镇市| www.legion6.org:安新县| www.775935.com:察隅县| www.rippan.com:华宁县| www.3dcursors.com:宜城市| www.cp0266.com:迁安市| www.nigumian.com:太康县| www.busybeesflorist.com:德清县| www.ppdownloader.com:神池县| www.jsxysp.com:文登市| www.gwmak.com:喀喇| www.afashionwonder.com:都匀市| www.fundacaoaristidesdesousamendes.com:雅安市| www.itosee.com:宁晋县| www.homeworkoutsforseniors.com:遂宁市| www.fitnessghost.com:定西市| www.biji-rumput.com:定日县| www.primpandwear.com:夏河县| www.sunn99.com:孝昌县| www.018448.com:荆门市| www.topgunshops.com:永泰县| www.ddmjml.com:类乌齐县| www.tjchengdu.com:喀喇| www.therapy-space.com:大埔区| www.theabsenceofsounds.com:锦屏县| www.droid-factory.com:芜湖市| www.smsactivation.com:卓尼县| www.anotherspace2.com:吴川市| www.netjetmarketing.com:印江| www.coimbratrail.com:合肥市| www.kneadinbread.com:久治县| www.lishanan.com:清河县| www.soledoubtshow.com:明光市| www.crowsphotography.com:九寨沟县| www.top10logo.com:剑河县| www.informasijakarta.com:祁门县| www.szhsmh.com:准格尔旗| www.rq966.com:长兴县| www.zontube.com:卢氏县| www.marcusminge.com:东乡县| www.chansamabut.com:甘南县| www.eyemok.com:抚宁县| www.huthug.com:会宁县| www.6565g.com:深州市| www.juandavidperafan.com:巴林右旗| www.jeanlucarmand.com:平利县| www.snmp-thermometer.com:印江| www.dragonsbloodstudios.com:连平县| www.hg39789.com:海盐县| www.face53.com:贵港市| www.tjajd.com:新巴尔虎右旗| www.jsahs.com:中方县| www.airmaxshoesnike.net:锡林郭勒盟| www.sharansoft.com:赤水市| www.caimenhu.com:灵石县| www.creativeshoponline.com:井研县| www.tj-mro.com:驻马店市| www.aolcoaches.com:平度市|