1. 歡迎來到期刊VIP網,使用學術咨詢服務
      期刊VIP網10年服務積淀,累計發表20萬份稿件,想要發表論文就來期刊VIP網
      快捷導航
      農業科技
      生物科學
      園林學
      生態學

      白英甾體化合物的抗炎活性研究

      發布時間:2020-12-25 09:06所屬分類:農業科技加入收藏

      摘 要:白英含有多種化學成分,具有潛在的藥用價值和開發前景,但抗炎機制的研究并不完整。本實驗以小鼠RAW264.7細胞為材料,研究白英甾體化合物的抗

        摘 要:白英含有多種化學成分,具有潛在的藥用價值和開發前景,但抗炎機制的研究并不完整。本實驗以小鼠RAW264.7細胞為材料,研究白英甾體化合物的抗炎作用機制,研究發現:白英甾體化合物能明顯抑制產生炎癥的小鼠RAW264.7細胞的TNF-α的炎癥因子的表達,提高炎癥細胞的線粒體膜電位,白英甾體化合物可能是通過保護線粒體來實現其抗炎作用。

        關鍵詞:白英甾體化合物;TNF-α;線粒體膜電位;抗炎

      現代農業研究

        炎癥是機體自發產生的一種正常反應,但如果反應過度,又會給機體帶來損傷。如何有效控制炎癥的過度損傷,減輕炎癥對身體帶來的危害,是如今所要研究的重要課題,對人類健康具有重要意義[1]。白英,又叫鬼目草、葫蘆草等,是茄科茄屬植物,屬多年生蔓性草本植物,分布十分廣泛[2]。白英有很大的藥用價值,其全草以及根部都可供藥用。目前臨床上對于白英的應用越來越多,在消腫解毒、抗腫瘤等方面尤為顯著。近年來,各研究學者開始對白英的抗炎作用進行研究,發現白英具有較好抗炎效果。研究表明,白英主要通過其各種化學成分發揮作用[3]。TNF-α是非常重要的一種炎癥因子,能夠反映細胞的炎癥水平,抑制TNF-α的表達,可以達到抗炎的目的。線粒體是真核生物非常重要的細胞器,在機體中發揮重要的作用,當機體產生炎癥時,線粒體會發生很明顯的變化,包括上調ROS水平、降低線粒體膜電位等,可以通過這些指標來觀察線粒體的情況,因此,研究白英甾體化合物的抗炎作用與對線粒體的關系具有重要意義。

        1 材料

        1.1 儀器

        細胞培養箱;超凈工作臺;酶標儀;倒置顯微鏡;電子天平;低速離心機;熒光顯微鏡等。

        1.2 試劑

        DMEM培養基;胎牛血清;PBS;雙抗;CCK-8試劑;TNF-α的ELISA檢測試劑盒;線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)。

        1.3 藥品與細胞

        白英甾體化合物干粉由吉林省中醫中藥研究院饋贈,利用PBS使其溶解,實驗所需細胞為小鼠RAW264.7細胞購自中國細胞庫,對照組為地塞米松。

        2 方法

        2.1 藥品配制及細胞培養

        取白英甾體化合物的干粉,用PBS將其溶解,然后過濾并進行高壓滅菌。小鼠RAW264.7細胞用DMEM培養基進行培養,加入胎牛血清和雙抗(青霉素、鏈霉素),在37℃、5%CO2的細胞培養箱中進行傳代培養,培養至對數生長期可供實驗使用。

        2.2 白英甾體化合物對小鼠RAW264.7細胞活力的影響

        取培養的小鼠RAW264.7細胞,加入培養基并輕輕吹打,使細胞懸浮到液體中,加入到96孔板中,使每孔體積200μL,細胞密度為1×104mL/個,放入培養箱中培養24h,使細胞貼壁生長,然后把孔內液體吸出,加入含有不同濃度的白英甾體化合物的DMEM培養基,并加入LPS,分為5組:空白組,白英甾體化合物高、中、低劑量組(白英甾體化合物的濃度分別為40μg·mL-1、20μg·mL-1、5μg·mL-1),地塞米松陽性對照組[4]。

        2.3 CCK-8法測定細胞活力

        上述5組作用24h后,每孔加入10μLCCK-8,靜置30min,把酶標儀的波長調至450nm,測定上述各孔吸收的OD值。

        2.4 白英甾體化合物對小鼠RAW264.7細胞TNF-α表達的影響

        細胞培養同上所述,分組情況同上,按照TNF-α的ELISA檢測試劑盒的說明書進行操作,測量小鼠RAW264.7的炎癥因子的表達情況。

        2.5 白英甾體化合物對小鼠RAW264.7細胞線粒體膜電位的影響

        在上述培養的細胞中,加入脂多糖,按照分組濃度,加入白英甾體化合物,在細胞培養箱中培養24h后,每組取1×105個細胞,重懸于0.5mL細胞培養液中,按照線粒體膜電位檢測試劑盒的說明書進行操作,以測定線粒體膜電位的變化情況[5]。

        2.6 數據的統計分析

        使用Graphpad Prism 5.0軟件對試驗數據進行統計學分析。

        3 結果

        3.1 白英甾體化合物對小鼠RAW264.7細胞活力的影響

        結果顯示,與空白組相比較,白英甾體化合物的高中低劑量組和陽性對照組細胞活性明顯偏低,白英甾體化合物的高中低劑量組又高于地塞米松組,但各組之間無統計學差異(P>0.05)。說明在試驗濃度范圍內,不同濃度的甾體化合物和地塞米松不影響小鼠RAW264.7細胞活性,對小鼠RAW264.7細胞沒有毒性作用,與林世和等研究結果一致[6]。

        3.2 白英甾體化合物對小鼠RAW264.7細胞TNF-α表達的影響

        結果顯示,與空白組比較,LPS顯著提升了小鼠RAW264.7細胞TNF-α的表達,其差異具有統計學意義(P<0.05),說明LPS誘導細胞產生炎癥,模型構建成功。與LPS組比較,40μg·mL-1和20μg·mL-1的甾體化合物與地塞米松能夠抑制小鼠RAW264.7細胞TNF-α的表達,其差異具有統計學意義(P<0.05),說明白英甾體化合物具有較好的抗炎作用。5μg·mL-1的甾體化合物則沒有顯示出抑制小鼠RAW264.7細胞TNF-α的表達的作用,對比LPS組,其差異無統計學意義(P>0.05),說明白英甾體化合物濃度較低時,其作用效果不明顯,與劉淑華等研究結果一致[4]。

        3.3 白英甾體化合物對小鼠RAW264.7細胞線粒體膜電位的影響

        通過JC-1法測定線粒體膜電位,用紅、綠2種顏色的熒光分別表示線粒體膜電位的高、低。結果顯示,空白組呈現紅色熒光,LPS組為綠色熒光,說明在LPS的刺激下,細胞產生炎癥;當加入白英甾體化合物后,線粒體膜電位有所提高,并且以劑量依賴性的方式增強線粒體膜電位,說明炎癥反應得到抑制。

        推薦閱讀:生態農業論文發表如何選擇期刊


      轉載請注明來自:http://www.aapkanpur.com/nongyekeji/54828.html

      上一篇:基于糧食安全的糧食生產供給側改革研究
      下一篇:農業土壤碳匯研究綜述

      幫您下載文獻

      *范文題目:

      *作者姓名:

      *期刊名稱:

        期刊刊期:

      *聯系方式:

      聲明:*號必填。下載文獻后將以文件形式發送至您預留的聯系方式,請確保有效性。寫好后點擊通知編輯

      乐彩网 www.tusbolsaspublicitarias.com:九龙坡区| www.donyahost.com:山东| www.avancemosconosur.org:开原市| www.emlakdukkaniist.com:寻甸| www.baidubocai.com:长寿区| www.busybeesflorist.com:谷城县| www.sckpw.cn:大洼县| www.svoidom.org:那坡县| www.griffithinstituteprints.com:高要市| www.imageislife.com:二连浩特市| www.shareuams.com:盐山县| www.sunfar001.com:崇义县| www.bobbysidenberg.com:福建省| www.myumldesigner.com:千阳县| www.21ahdns.com:滦平县| www.king1000.com:东阳市| www.315cxppwlx.com:常德市| www.dlzhutan.com:筠连县| www.640206.com:湘潭县| www.gthforex.com:合阳县| www.yujiangquan.com:镶黄旗| www.janielholidays.com:绥化市| www.tuoheng-china.com:哈尔滨市| www.blackangelunivers.com:浦城县| www.comm50.com:梅河口市| www.snuhctc.com:成安县| www.bljrsizuhs.com:陆丰市| www.yuanmeng6.com:辽阳县| www.tj-dqhcjt.com:广灵县| www.smrig.com:旬邑县| www.dogalviagra.com:乌兰察布市| www.dracowar-gaming.com:沙雅县| www.955461.com:五台县| www.sdgfgj.com:新兴县| www.friendsshelter.com:张掖市| www.lavinialewis.com:土默特左旗| www.stlcardsnstuff.com:炉霍县| www.midwestdivers.com:呼图壁县| www.lnujy.com:漠河县| www.cdtnjx.com:鄂伦春自治旗| www.coolvier.com:方正县| www.celiacosviajeros.com:桦川县| www.bikersforbeth.com:和林格尔县| www.robingrace-artist.com:项城市| www.s5865.com:泉州市| www.gaobaoit.com:平陆县| www.wjm8.com:远安县| www.iforoz.com:乌兰察布市| www.davisdeyoe.com:吐鲁番市| www.awleisure.com:鹤山市| www.foothill-bible.org:大石桥市| www.christianvoices.net:双柏县| www.sweetandnastyburlesque.com:永修县| www.mingyunjiaoxiangqu.com:涞源县| www.k2920.com:淮南市| www.maadqr-app.com:万山特区| www.gqsh99.com:社会| www.bestpicsforyou.com:冀州市| www.ewunthegun.com:博野县| www.carpetgalleryny.com:七台河市| www.six-369.com:郧西县| www.glass-suppliers.com:宣汉县| www.jasa228.com:平顶山市| www.qyu3.com:乌海市| www.hlswclub.com:玛沁县| www.wizard-from-oz.com:萨嘎县| www.yourwebside.com:宣汉县| www.howsvps.com:云安县| www.myproperties4sale.com:高安市| www.tcga4u.org:宁陕县| www.poengun.com:尤溪县| www.r3diamonds.com:平罗县| www.2323job.com:建始县| www.asscing.com:彰化市| www.wainini.com:汪清县| www.5566zy.com:崇仁县| www.hmartusa.net:荔波县| www.bishuikuai.com:靖远县| www.xx4y.com:特克斯县| www.iseshu.com:哈尔滨市| www.wfzfcn.com:姜堰市| www.4000359185.com:江西省| www.jonianet.com:宣武区| www.hg70345.com:石嘴山市|